原装elisa试剂盒-武汉默沙克(图)

（2） 包被抗1体（或抗原）的选择：将抗1体（或抗原）吸附在固相载体表面时，原装elisa试剂盒，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值较1大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。（3）　酶标记抗1体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗1体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗1体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

间接法中另一种干扰因素为正常血1清中所含的高浓度的非特异性。1人血1清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强，非特异IgG可直接吸附到固相载体上，有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中，抗原包被后一般用无关蛋白质（例如牛血1清蛋白）再包被一次，以封闭（blocking）固相上的空余间隙。另外，在检测过程中标本须先1行稀释（1:40~1:200），以避免过高的阴性本底影响结果的判断。

4）加底物显色

　　本法主要用于对病原体抗1体的检测而进行传1染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗1体建立检测相应抗1体的方法。

　　间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果，但应尽可能予以纯化，以提高试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血1清发生反应的杂质，例如以E.Coli为工程酶的重组抗原，如其中含有E.Coli成份，很可能与受过E.Coli感1染者血甭中的抗E.Coli抗1体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质，例如来自人血浆或人体组织的抗原，如不将其中的Ig去除，试验中也发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白，也会因竟争吸附而影响包被效果。