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 3).丙1酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至－15℃的丙1酮，elisa试剂盒进口，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙1酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙1酮。可得RZ值近于1的酶溶液。

  4).精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄色纤维状松软物，HRP产品的RZ值可达3.0左右，elisa 试剂盒 价格，置真空干燥器中低温保存。 3 y; ~/ O3 z+ B& A1 d

*组化染色

1. 石蜡切片，步骤同前。切片经贴片后，60℃烤片30min使蜡熔化，经二甲本Ⅰ、Ⅱ各10min，脱蜡。然后，将切片放入**、95%、90%、80%、70%中3-5min，再放入蒸馏水中3min，水化。

2．脱蜡和水化后，用PBS(pH7.4，具体看所用抗1体及染色试剂说明)冲洗3次，每次3分钟。洗瓶冲洗。

3. 根据抗1体的要求，对组织抗原进行相应的修复。可选步骤，具体见抗1体说明书。

4.每张切片加1滴或50μl 3%过1氧化，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3次，每次3分钟。此步骤是对内源性过氧化物酶含量高的组织而言。

4. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl的*1抗1体，室温下孵育60分钟或4℃过夜，具体参见每种抗1体的说明书。PBS冲洗3次，每次3分钟。

*性1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，原装elisa试剂盒，请尽快用水冲洗。2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。5． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，elisa试剂盒，密封保存，以免变质。6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。11． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。