猪elisa试剂盒-武汉默沙克(图)

一、ELISA实验通用规则

　　1、要保证移液枪的准确性，误差不能**过2%。可用水和电子天平进行确定。但较1好有专业人员进行矫正。

　　2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。

　　3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。

　　4、实验时，要使底物避光保存。

　　5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

　　6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

　　7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

　　8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶1标仪的晃动功能。

　　9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

　　10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板1机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

　　11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮后可长期保存。

　　12、底物是光敏感的，要在临用前现配。

（2）简*1法% E0 O+ v: s2 T

      本法是以NaIO４先将HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再与Ig上的氨基相结合，所获酶标记抗1体的产率高，将近70％的HRP和Ig结合，99％的Ig与酶结合，酶与Ig的活性无重大损失，是目前较1常用的方法。7 p3 C# @， w9 L5 i% F% @7 r9 Z

1）原理：; h  d) X' E' u  _& O5 y

      经典的过1法中需采用二1氟本封闭HRP上残留的α-和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来Wilson等改用在低PH下使NaIO4氧化HRP，从而省去了二1氟本封闭HRP步骤。HRP经NaIO4氧化后形成的醛化酶可与抗1体分子的氨基相连，形成斯夫氏硷，后者可进一步用NaBH4(或1胺)还原生成稳定的酶标记抗1体。

此IBL试剂盒能用于小鼠血1清，EDTA血浆，细胞上清中白介素-6的定量检测

　　试剂盒成分

　　1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG，猪elisa试剂盒，亲合纯化 96T

　　2 酶标记抗1体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG，亲合纯化 0.4mL x 1

　　3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2

　　4 E1IA缓冲液: 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1

　　5 标记抗1体稀释液: 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1

　　6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1

　　7 终止液: 1N酸 12mL x 1

　　8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶1标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗1体和显色剂)